See >>>
https://www.facebook.com/100066609529616/posts/125149239715393/
จาก: Adam Gaertner
วันที่: 11 มีนาคม 2020 เวลา 06:16:40 น. EDT ถึง: "Fauci, Anthony (NIH/NIAID) [E]"
เรื่อง: วิธีการผลิตอาวุธชีวภาพ Coronavirus
สวัสดีแอนโทนี่
นี่คือวิธีที่ไวรัสถูกสร้างขึ้น
Intervirion ฟิวชั่น HIV-luc (ACE2) (500 ng ของ p24) ผสมกับ 1,000 ng ของ p24
ของอนุภาค HIV-gfp ที่มีซอง ASLV-A, โปรตีน SARS-CoV S หรือ
ซองจดหมายทั้งสองใน PBS ที่อุณหภูมิ 4°C เป็นเวลา 30 นาทีเพื่อให้เข้าเล่มได้ ตัวอย่างถูกยกไปที่
37°ซ เป็นเวลา 15 นาทีเพื่อให้ Virion จัดเรียงโครงสร้างใหม่ถูกปรับเป็น pH ที่ต้องการด้วยกรดซิตริก 0.1 โมลาร์ พีบีเอส จากนั้นจึงเติม TPCK-ทริปซิน (ความเข้มข้นสุดท้าย 10 พิโกกรัม/มิลลิลิตร), CTSL, คาเทปซินบี (CTSB) (ความเข้มข้นสุดท้าย 2 พิโกกรัม/มิลลิลิตร) หรือบัฟเฟอร์ CTSI เพียงอย่างเดียว CTSL แบบลูกผสม (R&D Systems) ถูกกระตุ้นล่วงหน้าโดยการบ่มเป็นเวลา 15 นาทีที่ 10 ไมโครกรัม/มล. ใน 50 มิลลิโมลาร์ Mcs, pH 6.0, บนน้ำแข็ง CTSB ลูกผสม (ระบบ R&D) ถูกกระตุ้นล่วงหน้าใน 25 mM Mes, 5 mM DTT, pH 5.0 เป็นเวลา 30 นาทีที่ 25°C หลังจากการบ่ม 10 นาทีที่ 25°C การสลายโปรตีนถูกระงับโดยการเติม 300 ไมโครลิตรของ DMEM 10 ที่มีลิวเปปติน (25 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) และ STI (75 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) จากนั้น Virion ถูกบ่มที่ 37°C เป็นเวลา 30 นาทีเพื่อให้เกิดการหลอมรวมของเมมเบรน 100 ul ของของผสม virion ถูกเติมในสี่เท่าไปยังเซลล์ HeLa-Tva ที่ปรับสภาพก่อนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงด้วย leupeptin (20 pg/ml) เซลล์ถูกทำให้ติดเชื้อโดยการหมุนและฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 5 ชั่วโมง
ทันสมัย
ไฟเซอร์
gsk
ไบเออร์
GlaxoSmithKline
จอนรอน-จอห์นสัน
ไม่มีความคิดเห็น:
แสดงความคิดเห็น